EXTRACTION DE L’ADN DES CELLULES D’UNE BANANE

Objectif :

Extraire l’ADN des cellules d’une banane.

 

Matériel

·         

•       Une banane
• ·         Sel de table
• ·         Éthanol à 95%
• ·         Du liquide vaisselle
• ·         De l’eau
• ·         Un mortier
• ·         Une éprouvette
• ·         Un erlenmeyer
• ·         Une porte éprouvette
• ·         Un filtre à café
• ·         Un cylindre gradué de 50 ml
• ·         Une balance
• ·         Une spatule
• ·         Une nacelle
• ·         Un entonnoir

Protocole expérimental

Première étape :

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•        Mettre l’alcool préalablement au réfrigérateur.
• ·         Peser et ajouter 4g de sel.
• ·         Mesurer et ajouter 15 ml de liquide vaisselle.
• ·         Mettre la banane coupée en petits morceaux dans le mortier.
• ·         Mesurer et ajouter 30 ml d’eau.
• ·         Broyer l’ensemble dans le mortier, jusqu’à disparition complète des morceaux.

Deuxième étape

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•        Mettre le filtre à café dans l’entonnoir.
•          Filtrer le broyat dans un erlenmeyer.
•          Attendre la fin de la filtration.
•          Verser le filtrat dans une éprouvette.
•          Verser délicatement le double de la quantité d’alcool.
•        Attendre 5 minutes.
•         Observer la formation de filaments d’ADN entre la phase du filtrat et la phase d’alcool.

 

Interprétation

•          Le broyage permet de briser les parois des cellules.
•        Le liquide vaisselle permet de briser les membranes lipidiques du noyau des cellules et donc de libérer l’ADN.
•         Le sel permet de dissocier les protéines liées à l’ADN.
•         L’ADN est maintenant contenu dans le broyat.
•          La filtration permet de séparer l’eau salée et l’ADN des autres constituants.
•          L’ ADN passe à travers le filtre à café et se retrouve dans le filtrat, qui contient seulement de l’ADN et du sel.

Après l’ajout d’alcool :

·         

•        L’eau salée plus dense reste au fond de l’éprouvette.
•         L’alcool moins dense reste en surface.
•         Les filaments d’ADN remontent en surface, mais comme ils ne sont pas soluble dans l’alcool, ils restent dans l’interface alcool-eau salée.
•         Il y a formation de trois phases :
•      L’alcool
•      Les filaments d’ADN
•      L’eau salée.